红曲霉与中药合生素对延边黄牛免疫功能的影响

摘要：本实验研究红曲霉与中药合生素对延边黄牛血液免疫相关指标的影响。选择3头成年的延边黄牛母牛为试验动物(325±25 kg)，采用3×3完全拉丁方设计试验。分为对照组、红曲霉组、中药加红曲霉组。共分三期，每期12d，第12天于颈静脉采集血液。分别测定白细胞、红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A(IgA)的水平，结果表明：饲喂红曲霉与中药合生素对白细胞、红细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞无显著影响(P>0.05)。但显著提高了IgG、IgA、淋巴细胞、单核细胞含量和淋巴细胞百分比(P<0.05)，从而增强了机体的免疫功能。

关键词：延边黄牛；免疫；红曲霉；中药

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红曲霉能产生多种对人类有益的代谢产物，如酶、酸、酯、醇等一级代谢产物。此外，还能产生多种次级代谢产物，如色素、胆固醇合成抑制剂、抗生素、中药成分等，其药理活性物质可抑制胆固醇活性、降血压物质和麦角固醇[1]。中药、红曲霉除具有降血脂作用外，还具有降血压、降血糖、抗肿瘤、抗疲劳、预防骨质疏松、增强免疫力等药理作用。本文旨在研究红曲霉与中药合用对延边黄牛血液免疫相关指标的影响，为其合理利用红曲霉与中药提供理论基础。

1 材料与方法

1.1红曲霉湿粉的制作

将蒸熟的大米装入平皿内，约0.5-0.7cm，高压灭菌25min，同时用一只三角瓶内装0.2%的冰乙酸溶液少许，装入大米的平皿冷却后取斜面试管中紫色红曲霉( M．p u r p u r e u s ) 5-8次注入到10-20mL的0.2%的冰乙酸溶液中，取1mL接入到大米培养基内，于32℃的培养箱内培养10-14d。

烘干：将培养好的红曲霉湿料摊入容器内，放入55℃的烘箱内，干燥12-14h即可，然后粉碎制成粉状。

1.2红曲霉合生素的制备

将山药、神曲、山楂、红枣和红曲霉菌块分别粉碎，采用试验室内的微量混合机混合均匀备用。 

1.3试验动物与饲养管理

本试验于2009 年 4月-2009 年7月在延边大学农学院教学牧场完成。选择3头25月龄左右、健康、体重相近、体况良好、安装永久性瘤胃瘘管的延边黄牛母牛(325±25 kg)。

所有供试牛在试验前驱除体内、体外寄生虫，并且口服健胃散健胃。每天分两次饲喂（8:00和16:00），自由饮水，常规光照。饲喂前将精料与粗料混合均匀。每次饲喂后，清扫牛舍，保持牛体表的清洁，保证牛有清洁、干净的饮水和休息环境。牛入舍前，舍内及器具均彻底消毒。预饲期让牛逐渐适应新的环境和饲养管理方式，在此期间精料的喂量由少到多。试验中经常刷拭牛体，保持牛体清洁，被毛柔顺。定期放开运动[2]。

1.4试验设计

采用3×3完全拉丁方设计。基础日粮饲喂量由精料补充料、玉米青贮料组成，日粮精粗比为36:64。试验分为A、B、C三组，每组1头。每组基础日粮组成一致，首先A组饲喂基础日粮，B组饲喂基础日粮+0.5%红曲霉，C组饲喂基础日粮加0.5%的红曲霉与中药合生素制剂，进行轮换饲喂。精料组成及营养成分如表1。

表1  供试牛日粮精料组成及营养水平

注：以上各项均为干物质基础（%）。

1.5测定项目与方法

每期试验第12 天于早晨8:00饲喂前从颈静脉采集血液，在龙井市人民医院进行检测。测定指标包括白细胞、红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A(IgA)等。

1.6数据处理

试验数据应用SPSS 11.5统计软件进行差异分析，数据结果以平均数±标准差表示。

2 结果与分析

2.1对血液细胞的影响

由表2可知：淋巴细胞、单核细胞和淋巴细胞百分比红曲霉组和红曲霉+中药组都显著高于对照组(P<0．05)。分别高出27.76%、16.92%、13.64%、9.52%、14.16%、18.37%、白细胞、红细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞整个试验期各组无显著影响(P>0.05)，都在正常范围内。

表2   红曲霉与中药合生素对延边黄牛血液细胞的影响

注：同一行中肩标字母不同，大写字母表示差异极显著(P<0.01)，小写字母表示差异显著(P<0.05)[3],下同。

2.2对血清IgG，IgA的影响

    血液中IgG、IgA的多少在一定的程度上能够反映牛的免疫能力。由表3可以看出，饲喂红曲霉与中药合生素对延边黄牛血液中IgG、IgA浓度有一定影响。IgG含量红曲霉组和红曲霉+中药组显著高于对照组(P<0．05)，分别高出10.16%、16.50%。IgA含量红曲霉+中药组显著高于对照组(P<0．05)，高出17.48%，红曲霉组与对照组相比差异不显著(P>0.05)。

表3  红曲霉与中药合生素对延边黄牛血清IgG，IgA的影响

3 讨论

3.1红曲霉与中药合生素对对血液细胞的影响

     牛体免疫系统的免疫细胞主要是淋巴细胞，包括T淋巴细胞、B淋巴细胞以及单核细胞等， 是参与免疫应答反应的核心细胞，主要参与机体的细胞免疫，它在一定程度上代表着机体细胞免疫功能的状态，淋巴细胞数量增多，淋巴细胞百分含量增加，单核细胞数量增多反映出机体的细胞免疫功能增强[4]。本试验中淋巴细胞、淋巴细胞百分比和单核细胞红曲霉组和红曲霉+中药组都显著高于对照组。

    白细胞、红细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞整个试验期各组无显著影响，但都在正常范围内。说明红曲霉与中药合生素对其影响不大。

3.2红曲霉与中药合生素对延边黄牛血清IgG，IgA的影响

    免疫球蛋白(Immfinoglobulin，简称Ig)是人类及高等动物受抗原刺激后体内产生的能与抗原特异性地相互作用的一类蛋白质，又称为抗体，普遍存在于哺乳动物的血液、组织液、淋巴液及外分泌物中。是机体免疫系统的一个重要组成部分[5]。免疫球蛋白是所有蛋白质中最不均一的一类蛋白质，根据其理化性质尤其是免疫学性质，可将其分为5类，即IgG、IgA、IgM、leD及IgE，牛体内以IgG、IgA为主。免疫球蛋白IgG、IgA含量升高，说明机体体液免疫增强。

    中药和红曲霉除具有降血脂作用外，还具有降血压、降血糖、抗肿瘤、抗疲劳、预防骨质疏松、增强免疫力等药理作用。所以本实验中延边黄牛IgG含量红曲霉组和红曲霉+中药组显著高于对照组。IgA含量红曲霉+中药组显著高于对照组，红曲霉组与对照组相比差异不显著。说明饲喂红曲霉与中药合生素能增强机体的免疫力。   

4 结论

    饲喂红曲霉与中药合生素能够增强免疫细胞功能，提高牛体主要免疫球蛋白含量，从而增强机体的免疫力。

参考文献:

[1] 纪远中．红曲及红曲霉的研究现状及进展[J].天津药学，2005，l 7(2)：65-67.

[2] 杨胜．家畜饲养实验指导[M]．北京：农业出版社，1990：52—66.

[3]马森，王荣鑫，张才骏，等．青海高原家畜生理生化参数[J]．青海畜牧兽医杂志，1994，24(4)：36—41．

[4] 李建国，李英，曹玉凤，等．蛋白质补充料替代日粮中棉籽饼对肉牛生产性能和血液生理指标的影响[J]．动物营养学报，2001，13(4)：50—53.网址：http://www.cnkikbs.com

[5] 刘景田,张洁． 红细胞免疫学[M]．西安：陕西科学技术出版社 ，1995.l1—100．